Resumo. Os óleos essenciais de plantas são considerados fontes de substâncias biologicamente ativas. A Família Asteraceae tem sido amplamente estudada quanto à composição química e atividade biológica. No gênero Baccharis, os compostos mais estudados são os flavonoides e os terpenoides. Baccharis dracunculifolia DC. é nativa do cerrado brasileiro e considerada a principal fonte botânica da própolis verde. Os objetivos deste estudo foram avaliar a atividade antibacteriana do óleo essencial das folhas e flores de B. dracunculifolia e seu composto ativo, o nerolidol, de forma pura ou combinada ao EDTA ou à lisozima a cepas de bactérias patogênicas Gram positivas e Gram negativas. Foram utilizadas as técnicas de difusão em ágar e difusão em discos de papel filtro para avaliar a atividade antibacteriana das substâncias: óleo essencial de B. dracunculifolia (Ole30), nerolidol puro ou combinado ao EDTA ou a lisozima, e os antibióticos usados como controles: gentamicina, tetraciclina, estreptomicina, oxacilina, cloranfenicol, vancomicina, penicilina, amoxicilina, rifampicina e eritromicina. As bactérias mais sensíveis ao Ole30 foram: Proteus sp., Staphylococcus sp., Escherichia coli e Listeria monocytogenes. No teste de difusão em poços, o Ole30 e o cloranfenicol inibiram Proteus sp., Staphylococcus sp. e L. monocytogenes, mas Salmonella enterica subesp. enterica Typhimurium e S. Panama foram resistentes ao Ole30. Staphylococcus aureus ATCC 25923 mostrou-se resistente ao Ole30 em ambas as técnicas utilizadas. O nerolidol puro inibiu Staphylococcus sp. e L. monocytogenes, e na forma combinada ao EDTA inibiu Proteus sp., em combinação à lisozima inibiu S. aureus ATCC 25923 e L. monocytogenes. Palavras-chave: Antibacteriana. Óleo essencial. Difusão em ágar. Nerolidol.