Resumo. O presente estudo foi realizado na bacia hidrográfica do Rio Matipó, um afluente do Rio Doce, em Minas Gerais – Brasil. O principal objetivo foi avaliar a contaminação microbiológica das águas da bacia devido à influência da atividade humana. Para tal, foram realizadas amostragens de água em 25 estações de monitoramento situadas ao longo do curso hídrico em períodos sazonais distintos. Essas amostragens possibilitaram mensurar variáveis químicas e microbiológicas das águas. A análise dos dados obtidos permitiu observar a limitação dos usos da água da bacia hidrográfica pelo fato de estar contaminada com microrganismos, alguns potencialmente patogênicos. Os impactos ambientais verificados na bacia hidrográfica, como criação de animais nas margens e, principalmente, lançamento de esgoto sanitário sem tratamento, foram os principais fatores que interferiram na limitação dos usos da água para balneabilidade e para o abastecimento público. Keywords: Contamination, E. coli, Sewage, Doce River    Abstract The present study wascarried outin the Matipó river watershed, a tributary of the Doce river, in Minas Gerais,Brazil. The main objective was to evaluate the microbiological contamination of waters of the basin due to the influence of human activities. In order to do so, water sampling was  performed  in  25  sampling  stations  along  the water course in distinctseasonal  periods. These samples made it possible to measure chemical and microbiological variables of the waters. The analysis of the obtained data allowed to noticethe limitation of the water uses inthe watershed due to contamination withmicroorganisms, some potentially pathogenic. The environmental impacts observed in the watershed, such as livestock famingon the banks and mainlythe release of untreated domestic sewage were the main factors that interfered with the limitation of water usefor leasure purposes and public supply.