Resumo. O desenvolvimento de novos antibióticos está atrelado ao desafio de combater microrganismos super-resistentes, bem como possuir amplo espectro de ação. Para atingir essa meta, várias fontes de obtenção são pesquisadas nos mais diversos ambientes. Nesse sentido, este trabalho buscou a utilização de fungos filamentosos coletados no Bioma Caatinga na microrregião do Cariri paraibano para a produção de antibióticos, considerando-se a importância de pesquisas nesse sentido, utilizando fungos dessa região, abrindo expectativa de inovação na indústria farmacêutica. As amostras fúngicas foram coletadas e avaliadas quanto ao seu potencial em produzir compostos antimicrobianos contra linhagens patogêncas de Escherichia coli (ATCC 25922) e Staphylococcus aureus (ATCC 25923). Entre os 72 isolados avaliados, 57 (79,17%) apresentaram alguma atividade antimicrobiana, dos quais 27 (47,37%) possuíram atividade contra ambas as bactérias, e 30 (52,63%) com atividade contra apenas uma delas. Nos testes antibiograma, foram selecionados os isolados CDSA30 e CDSA71 para a purificação dos extratos antibacterianos por meio de CLAE-FR. Na purificação dos extratos antimicrobianos, foram encontradas duas substâncias que apresentaram atividade antibiótica contra as duas cepas bacterianas utilizadas; esses fungos foram identificados como pertencentes ao gênero Aspergillus. O estudo do efeito da temperatura sobre a produção de antibióticos mostrou que há maior rendimento na produção de metabólitos com atividade antimicrobiana quando a temperatura de cultivo for a 45 ºC. Palavras-chave: Metabólitos secundários. Biotecnologia. Purificação. Antibiograma.